大鼠大脑中动脉缺血模型建立全攻略：线栓法详解、评估标准与问题预防

大鼠大脑中动脉缺血模型的重要性

　　在缺血性脑血管疾病的研究中，手术建立动物脑缺血模型是不可或缺的重要手段。其中，局灶性脑缺血模型又分为开颅性和非开颅性两种，而非开颅性模型中的线栓法因其高成功率和易于判断的成模标准，受到了研究者的广泛青睐。本文将详细介绍线栓法的手术图谱、建模方法、模型评估标准以及常见问题的预防措施。

解剖学基础与线栓导入路径

　　大鼠的大脑供血主要依赖于四条动脉：左右颈内动脉和左右椎动脉。这些动脉在颅腔内汇合形成基底动脉，为大脑提供必要的血液供应。在线栓法建模中，我们通常选择经总动脉-颈内动脉-大脑willis环-大脑中动脉分叉处的路径进行线栓导入。

建模方法详解

材料准备

　　进行建模前，需准备以下材料：Wistar/SD大鼠（雌雄不限，体重180～250g）、常规消毒药品、手术器械以及特制的栓线。

手术步骤

　　1. 术前准备：对大鼠进行常规麻醉，仰卧保定在手术台上，四肢用胶带松紧适度粘贴固定，并进行消毒处理。根据术者习惯，动物头部可以左右偏斜，以防止鱼线插入翼腭动脉。脖子下方可安放枕头，以便于操作。
2. 血管分离：颈部深层血管主要包括颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。在分离神经时，需注意不要过度牵拉，以免造成心跳、呼吸改变导致动物死亡。
3. 线栓插入：
- 经总动脉-颈内动脉-大脑中动脉路线：颈部正中切开，钝性剥离颌下腺，暴露颈总动脉与迷走交感神经链。在颈总动脉穿线两根备用，用于结扎颈总动脉暴露处的近心端和固定鱼线。动脉夹夹闭颈内动脉后，在颈总动脉远心端近颈内颈外动脉分叉处开一小口，将制备好的鱼线插入并向远心端推进至颈内动脉夹闭处，松开动脉夹，调整插线推进方向和角度。以颈内动脉与咬肌边缘交界处为标志，插入深度为18～20mm，以稍有抵触感为止，用2-0丝线打死结结扎固定插线与颈总动脉。最后，连续缝合筋膜和间断缝合皮肤，并进行消毒处理。
- 经外动脉-颈内动脉-大脑中动脉路线：与经总动脉路线类似，但需在颈外动脉上切一小口，并牵拉颈外动脉尽量与颈内动脉成直线，以便于鱼线插入。
- 颈内动脉-大脑中动脉路线：此路线适用于永久性缺血模型。在颈内动脉上切一小口后，将鱼线插入并向远心端推进，调整方向和角度后固定。

线栓路线选择原则

　　线栓路线的选择主要取决于是否需要缺血再灌注以及将操作对动物的影响降到最低。经总动脉-颈内动脉-大脑中动脉路线操作简单，适用于缺血及缺血再灌注制作；经外动脉-颈内动脉-大脑中动脉路线再灌注效果明显可靠；而颈内动脉-大脑中动脉路线则适用于永久性缺血模型。

模型评估标准

　　模型建立后，需对其进行评估以确保其有效性。评估标准主要包括血流量检测和临床症状观察。
- 血流量检测：使用多普勒血流测量仪进行测量，以评估大脑中动脉的血流情况。
- 临床症状观察：术后3-6小时观察大鼠的行为学变化，包括对侧肢体无力、行走时明显向对侧旋转、不能完全伸展对侧前肢、提尾倒立时身体弯向对侧以及手术对侧前肢下垂等症状。重者可能出现瘫痪、身体明显倾斜和头偏向对侧等情况。